小鼠原代肝竇內皮細胞的三種提取方法

    肝竇內皮細胞(L iver Sinusoidal Endothelial Cells)屬于肝臟中的非實質性細胞,在肝臟中起到屏障、物質代謝、超濾內吞,抗原呈遞等作用。近年來國內外學者對肝竇內皮細胞分離方法進行了大量的研究,但要獲得純度高，細胞活性好,功能穩定的肝竇內皮細胞仍很困難，尤其是小鼠肝竇內皮細胞。由于小鼠品系豐富可以更充分的滿足各類研究的需要,所以獲得細胞活性好的小鼠肝竇內皮細胞具有重要意義。

　　目前，小鼠原代肝竇內皮細胞采用以下三種提取方法:兩步原位灌流結合密度梯度離心法、機械分離結合酶消化及密度離心法、免疫磁珠分選及流式分選法。兩步原位灌流結合密度梯度離心法主要集中于大鼠，由于技術條件的限制,較少應用于小鼠的肝竇內皮細胞分離,且該方法無法將肝竇內皮細胞和枯否細胞(kupffer cells)分離，導致最終獲得的細胞純度受到影響;機械分離結合酶消化及密度離心法對細胞損傷過大,且會造成組織塊表面消化過度,內部消化不足;免疫磁珠分選及流式分選法所得到的小鼠肝竇內皮細胞雖然純度高，但是由于肝竇內皮細胞缺乏特異性的表面標志物，使得細胞獲得量少，且細胞分選前必須加上某些化學標記有可能造成細胞的分化或凋亡，同時其昂貴的儀器及試劑費用限制了在賂個實驗室的應用。